《植物生理学报》 2006, 42(3): 499-501

青稞中b-1,3-葡聚糖酶的纯化及其抗血清的制备

黎柳君 魏慧敏 吴守锋 郭军伟 杜林方*

四川大学生命科学学院，成都 610064

通信作者：杜林方；E-mail: dulinf@mail.sc.cninfo.net；Tel: 028-85412766

摘　要：

萌发的青稞种子经醋酸钠缓冲液抽提，50%~85% 硫酸铵分级沉淀，DEAE-Cellulose 52、CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-75 分子筛层析，得到具活性的b-1,3- 葡聚糖酶。SDS-PAGE 检测显示分子量27 kDa 左右的主带(95%)。将纯化的b-1,3- 葡聚糖酶对新西兰兔进行免疫制备抗血清，双向免疫扩散测定效价为1:64。免疫印迹分析表明纯化的b-1,3- 葡聚糖酶免疫杂交带亦在27 kDa 处。

关键词：b-1,3- 葡聚糖酶；青稞；纯化；抗血清；免疫印迹

收稿：2005-11-07   修定：2006-03-13

资助：高等学校骨干教师资助计划(20006502)。

青稞中b-1,3-葡聚糖酶的纯化及其抗血清的制备

黎柳君 魏慧敏 吴守锋 郭军伟 杜林方*

四川大学生命科学学院，成都 610064

Corresponding author: ; E-mail: dulinf@mail.sc.cninfo.net; Tel: 028-85412766

Abstract:

萌发的青稞种子经醋酸钠缓冲液抽提，50%~85% 硫酸铵分级沉淀，DEAE-Cellulose 52、CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-75 分子筛层析，得到具活性的b-1,3- 葡聚糖酶。SDS-PAGE 检测显示分子量27 kDa 左右的主带(95%)。将纯化的b-1,3- 葡聚糖酶对新西兰兔进行免疫制备抗血清，双向免疫扩散测定效价为1:64。免疫印迹分析表明纯化的b-1,3- 葡聚糖酶免疫杂交带亦在27 kDa 处。

Key words: b-1,3- 葡聚糖酶；青稞；纯化；抗血清；免疫印迹